가장 정확한 결과를 얻으려면 AccuPyc로 측정한 샘플이 측정된 세포 부피의 10% 이상을 차지해야 합니다. 시료 양이 적거나 시료 부피 밀도가 낮은 경우 이 값을 얻기 어려울 수 있습니다.
셀 부피는 부피 보정 프로세스를 통해 결정되며 AccuPyc 시료 챔버와 시료 컵의 부피에 따라 달라집니다. 세포 부피를 낮추어 시료 점유 비율을 높이는 데 사용할 수 있는 두 가지 방법이 있습니다.
방법 1: 챔버 인서트 사용
챔버 인서트는 알루미늄 실린더와 저용량 샘플 컵으로 구성됩니다. 알루미늄 실린더는 시료 챔버의 한 영역을 차지하여 셀 부피를 줄이고 새로운 저용량 시료 컵의 홀더 역할을 합니다. 챔버 인서트를 사용하여 분석을 시작하기 전에 인서트를 사용하여 부피 보정을 수행해야 합니다. 사용 가능한 인서트 크기는 표 1에 나와 있습니다.
방법 2: 보정 구 사용
부피가 알려진 비다공성 샘플을 사용하면 세포 부피를 줄일 수 있습니다. 부피가 잘 알려져 있고 추적이 가능하기 때문에 보정 구는 이 방법에 이상적입니다. 분석은 보정 구와 밀도를 알 수 없는 샘플을 모두 사용하여 수행됩니다. 이 방법을 사용할 경우 AccuPyc에서 분석을 시작하기 전에 다음 단계를 수행해야 합니다.
- 표준 시료 컵 크기를 사용하여 부피 보정을 수행하여 측정된 셀 부피를 얻습니다.
- 보정 구의 부피를 기록합니다. 보정 구가 아닌 비다공성 물질을 사용하고 부피를 알 수 없는 경우 분석을 수행하여 부피를 결정합니다.
- 측정된 셀 부피에서 보정 구의 부피 또는 비다공성 물질의 부피를 뺍니다.
- 새로 계산된 셀 용적을 적절한 위치에 입력합니다. 셀 볼륨은 다음 위치에서 찾을 수 있습니다:
- Windows 소프트웨어 - 단위 메뉴 -> 보정 -> 볼륨 보정
- 키패드 소프트웨어 - 설정 -> 보정 데이터
방법 비교
분석은 표준 시료 컵, 첫 번째 방법의 경우 10cm3 인서트, 두 번째 방법의 경우 장치와 함께 제공되는 보정 구(약 51cm3)를 사용하여 100cm3 AccuPyc에서 수행되었습니다. 부피가 2.421875cm3 및 0.718532cm3인 두 개의 별도 보정 구에 대해 데이터를 수집했습니다. 이 실험에 사용된 캘리브레이션 구체는 비다공성 텅스텐 카바이드 합금입니다. 표 2는 수집된 데이터의 평균을 보여줍니다.
측정된 시료 부피는 챔버 부피 점유 비율이 증가함에 따라 더 정확해집니다. 이 실험의 시료 재료는 비다공성입니다. 다공성 물질을 분석할 때는 개방된 다공성으로 인해 시료의 부피가 골격 부피보다 크기 때문에 실제 부피와 측정된 부피의 차이가 더 클 것으로 예상됩니다.
